Đề tài Tìm hiểu về chất kháng sinh Enrofloxacin trong nguyên liệu tôm

Chào Mừng Thầy Cô Và Các Bạn Đến Với Buổi Thuyết Trình Hôm NayBộ Công ThươngTrường Đại Học Công Nghiệp Thực Phẩm TP.HCMKhoa Thủy SảnTìm Hiểu Về Chất Kháng Sinh Enrofloxacin Trong Nguyên Liệu Tôm GVHD: Trần Quốc Đảm Nhóm : 1Nội Dung Tổng quan về nguyên liệu tôm Tìm hiểu về chất kháng sinh Nguyên nhân gây nhiễm Enrofloxacin Cách xác định EnrofloxacinI. Tổng quan về nguyên liệu tôm.Nguyên liệu tômTôm là mặt hàng xuất khẩu chủ lựcGồm 12 loài thuộc 6 nhómNguyên liệu tôm được phát triển theo 2 hình thức.Đánh bắtNuôi trồngTrong đó, tôm sú, tôm thẻ chân trắng là những đối tượng nuôi quan trọng.Sản lượng tôm nuôi liên tục tăng cao trong các năm, bình quân đạt 12,77%/năm. Đóng góp đáng kể vào tăng trưởng tổng sản lượng thủy sản của cả nước. Hoạt động khai thác tăng khá thấp với mức tăng bình quân 6,42%/năm.2. Tình hình xuất khẩu hiện nayViệt Nam đang gặp khó khăn khi đưa các mặt hàng tôm vào Châu Âu do tồn dư kháng sinh cấm.Từ năm 2014 đến nay đã có gần 32.000 tấn hàng bị trả về.Việt Nam có đến 582 lô hàng bị 38 nước trả về, trung bình mỗi công ty có năm lô trả về.Các lô hàng bị trả về chủ yếu do nguồn nguyên liệu không sạch.II. Tìm hiểu về chất kháng sinhĐịnh nghĩa:Là những chất được chiết xuất từ các vi sinh vật, nấm, được tổng hợp hoặc bán tổng hợp, có khả năng tiêu diệt vi khuẩn hay kìm hãm sự phát triển của vi khuẩn gram âm – gram dương một cách đặc hiệu. Mục đích:Ngăn chặn và xử lý các mầm gây bệnh cho thủy, hải sản để đáp ứng nhu cầu của con người.Phân loại: gồm 11 nhóm chủ yếuβ- Lactam (Peniciline, Amoxycilline, Cloxaciline, Cephalosporins,...) Aminoglucosides (Apramycin, Gentamycin, Kanamycin, Neomycin, Spectinomycin, Streptomycin) Macrolides (Erythromycin, Josamycin, Spiramycin, Tylosin). Tetracyclin (Tetracyclin, Oxytetracyclin, Doxycyclin, Chlotetracyclin) Fluoroquinolones (Flumequine, Enrofloxacin, Norfloxacin, Oxolinic acid, Marbofloxacin, Danofloxacin, Difloxacin...)Phenicol (Florfenicol, Thiamphenicol) Polymyxins (Colistin)Pleuromutilins (Tiamulin) Lincosamides ( Lincomycin) Sulfamid ( Sulfachlorpiridazine, Sulfadiazine, Sulfadimethoxine,....)Diaminopyrimidine ( Trimethoprim) Tìm hiểu về EnrofloxacinLà một tác nhân hóa học được tổng hợp từ các fluoroquinolone dẫn xuất axit cacboxylic.Nó có tác dụng kháng khuẩn đối với một loạt các vi khuẩn. Công thức hóa học: C19H22FN3O3 Trọng lượng phân tử: 359.4 g/mol Nhiệt độ nóng chảy: 219-212 0CTính chất vật lý:Là tinh thể màu vàng nhạt vị đắng, tan trong NaOH, methane, methanol, dung môi hữu cơ và xyanua. Tan nhẹ một phần trong nước ở pH = 7Có 2 giá trị pKa: khoảng 5 và 8 – 9Ảnh hưởng của dư lượng kháng sinh Mất thị lực, mù vĩnh viển. Nhức đầu, mệt mỏi, mất ngủ. Gây phản ứng nghiêm trọng: phù mặt, phù thanh quản, khó thở tính mạng con người. Tích lũy lâu: gây suy gan, suy thận, suy tủy, thậm chí gây ung thư, đột biến gen.III. Nguyên nhân lây nhiễm Enrofloxacin trong tômKiểm soát lỏng lẻoHiện nay, việc mua bán kháng sinh nguyên liệu thú y thủy sản giữa các doanh nghiệp trên thị trường và thành phẩm ở các đại lý, cửa hàng đang rất bát nháo, lộn xộn.“Mê hồn trận" kháng sinh nguyên liệu Ý thức của người nuôi tôm Lạm dụng thuốcTại Việt Nam, người nuôi tôm vẫn đang sử dụng phổ biến Enrofloxacin trộn với thức ăn để trị bệnh cho tôm trong giai đoạn nuôi, đặc biệt đối với tôm chân trắng.Đặc biệt là con tôm, người nuôi dùng thuốc kháng sinh không kiểm soát dẫn tới tồn dư kháng sinh.Phương Pháp Xác Định Enrofloxacin Trong Thủy SảnQUINOLONE ELISA KIT 1.Thành Phần Bộ Kits Elisa- 1 khay Microwell phủ kháng thể - 6 lọ dung dịch chuẩn - Dung dịch cộng hợp - Dung dịch rửa - Cơ chất 2.Thiết Bị Và Dụng Cụ Hóa Chất Hóa chất:+ NaCl+ HCl+ NaOH+ Methanol+ Hexane+ Nước cất Chuẩn Bị Dung Dịch MẫuĐồng hóa mẫu 1 phút với tốc độ 10.000v/p- Cân 2g mẫu đã đồng hóa cho vào ống ly tâm 25ml, thêm 6ml dịch chiết trộn đều 5 – 10 phút- Ly tâm tốc độ 4000v/p thời gian 5 phúc ở 20 -25°C .- Hòa tan 1ml trên bề mặt với 45µL dd NaOH. 1 M , điều chỉ pH 7-8- Dùng Mcropipette hút 50 µL dd lỏng đem chuẩn bị phân tíchTiến Hành Phân Tích Bằng Phương Pháp Elisa100μL cộng hợpLắc đềuỦ ở 27̊C, 40PTiến Hành Phân Tích Bằng Phương Pháp ElisaGiữ và lắc nhẹ trộn đều dd, để yên 20p, 27̊CTiến Hành Phân Tích Bằng Phương Pháp ElisaLắc nhẹ, Đọc kết quả trên máy đọc elisa trong 5pTiến Hành Phân Tích Bằng Phương Pháp ElisaDiễn giải kết quảMàu đậm = ít kháng sinhMàu nhạt = nhiều kháng sinh So sánh màu hoặc mật độ quang của các giếng mẫu với màu hoặc mật độ quang của các giếng đối chứng âm. Từ đó xác định được mức độ nhiễm Tiến Hành Phân Tích Bằng Phương Pháp ElisaHoặc chính xác hơn ta vẽ đồ thị đường chuẩn của Quinolone và dựa vào đó định lượng mức độ nhiễm của mẫu Tính toán theo công thức sau :%ức chế = [1 – ( A0 /Ax)] x 100Trong đó : - Ao : mật độ quang tại giếng đối chứng âm - Ax: mật độ quang tại giếng mẫuCâu hỏi củng cố Kháng sinh Enrofloxacin nằm trong nhóm nào?SulfamidMacrolidesAminoglucosidesFluoroquinolones2. Nguyên nhân nhiễm Enrofloxacin vào tôm?Người dân dùng thuốc kiểm soát môi trường và chữa bệnh cho tômSự quản lí lỏng lẻo của cơ quan có thẩm quyền Sự thiếu hiểu biết về danh mục thuốc cấm, hạn chế sự dụng Tất cả đáp án trên3. Kháng sinh Enrofloxacin tiêu diệt hay kiềm hãm sự phát của vi khuẩn nào?Vi khuẩn gram dươngVi khuẩn gram âmCả 2 đều đúngCả 2 đều sai4. Kháng sinh gồm....nhóm?108 11 145. Cách diễn giải kết quả phù hợp? Màu nhạt chứng tỏ....kháng sinhNhiềuÍtKhông có kháng sinhKhông thể hiện gì cảCảm Ơn Thầy Cô Và Các Bạn Đã Lắng Nghe