Khóa luận Thử nghiệm phân lập và tạo dòng nguyên bào sợi từ mô phôi thai người

1. ĐẶT VẤN ĐỀ Từ khi có con người tồn tại, cho đến khi con người nhận thức được sự tồn tại của mình là loài duy nhất, được ban tặng khả năng tư duy sáng tạo vô tận trong số các loài cùng tồn trong tự nhiên và sự tồn tại của mỗi người là duy nhất và là thiêng liêng. Mỗi người sẽ không được lặp lại sự tồn tại của mình lần thứ hai trong tiến trình lịch sử. Và do đó, bệnh tật-chết chóc và thiên tai là thứ đáng kinh hãi trong suốt quá trình tồn tại của loài người từ thời sơ khai đến nay cũng như trong cuộc đời của mỗi người. Theo xu hướng chung, lúc nào con người cũng muốn tư duy, khám phá, và chinh phục thiên nhiên. Ngay cả những hiện tượng sinh lý tự nhiên diễn ra trong chính bản thân con người của mình. Các hiện tượng và vạn vật xung quanh đều trở thành đối tượng vô tận để con người tư duy Con người không ngừng lao động sáng tạo, từ đời này sang đời khác. Kết quả đáp lại cho những công lao lao động ngàn đời đó là một nền khoa học tiên tiến và hiện đại. Ngày nay, con người có m?t cuộc sống tiện nghi, có khả năng chế ngự được thiên tai. Với nền khoahọc tiên tiến, hiện đại, con người có thể sản xuất hàng loạt công cụ để cải tạo thiên nhiên, sản xuất được lượng dư thừa các sản phẩm phục vụ cho tiện ích. Trong thời đạithông tin điện tử,Công nghệ Thông Tin giúp những con người cách xa nhau hàng vạndặm có thể liên lạc và nhìn thấy nhau. Dù có tài ba đến đâu, dù là bất cứ ai cũng đều chịu chung số phận là: tuân theo qui luật sinh lý chung (sinh, lão, bệnh, tử). Và đó là chân lý về sự tồn tại của con người trên trái đất này, điều đó cũng như trái đất đã thể hiện sự tồn tại của nó trong thái dương hệ này là phải quay xung quanh mặt trời theo một quỹ đạo nhất định và có chu kỳ. Nhưng có lẽ giới hạn của chân lý về sự tồn tại của mỗi người có giới hạn đó có nguy cơ bị sụp đổ khimà Di Truyền Học đã có thể can thiệp đến tận cùng nguồn gốc của sự sống. Một khi Công Nghệ SinhHọc có bước độtphá, phát triển vượt bậc, có thể tạo ra cơ quan thay thế, có thể sử dụng liệu pháp gen để chửa bệnh, có thể sử dụng liệu pháp di truyền để cải thiện tuổi thọ của con người,thì lúc đó, bệnh tật và chết chóc có lẽ, sắp sửa, sẽ không còn là nỗi kinh hoàng của bao người, bao thế hệ. Nhiều người, nhiều nhà khoa học trên thế giới đang kỳ vọng về những sự tốt đẹp đó. Mỗi người trong chúng ta có lẽ đều đang trong trạng thái hoài nghi, bàng hoàng và lo lắng đến những điều may rủi, nhưng ít nhiều gì cũng đều sẽ mong đợi điều đó xảy ra. Theo xu hướng phát triển tri thức chung của thế giới, Công Nghệ Sinh Học là ngành khoa học phát triển kế tục ngành Công Nghệ Thông Tin , để có thể phát triển mạnh mẽ thì ngành Công Nghệ Sinh Học phải nhờ vào sự hỗ trợ đắc lực của ngành Công Nghệ Thông Tin. Trong khi giới hạn và đỉnh cao của Công Nghệ Thông Tin không ngừng được tiệm cận thì Công Nghệ Sinh Học đang chập chững bước đi. Nhiều nước trên thế giới như: Mỹ, Pháp, Bỉ, đã có bề dầy kinh nghiệm nghiên cứu và đầu tư cho Công NghệSinh Học trên nửathế kỷ nay. Sử dụng công nghệ nuôi cấy tế bào động vật cũng như nuôi cấy tế bào người để phục vụ cho y học, sản xuất dược phẩm (insulin, interferon, ) và thử thuốc. Các nghiên cứu nuôi cấy nguyên bào sợi người đã được thực hiện thànhcông tại các nước như Mỹ, Pháp, Bỉ.qua nuôi cấy tế bào nước ối, nuôi cấy tế bào da, gai nhau, mô thai sẩy. [Beechm Group Ltd, GB1525022] Mọi thứ phải bắt đầu từ cái sơ khai nhất, từ không biết cho tới biết, từ không có cho tới có, từ không thể cho đến có thể, nhất là đối với ngành khoa học ngiên cứu cơ bản như: nuôi cấy tế bào động vật. Nuôi cấy tế bào người hầu như chưa có thành tựu đáng kể ở Việt Nam. Tế bào nguyên bào sợi người là loại tế bàodễ dàng nuôi cấy nhất so với các loại tế bào khác cùng loài. Vả lại, nó có tiềm năng ứng dụng vô cùng phong phú, như: + Là loại tế bào tiềm năng, kém biệt hóa, có thể biệt hóa thành tế bào xương, ứng dụng trong trong sản xuất vật liệu cấy ghép. +Sử dụng để nghiên cứu di truyền, sản xuất vacxin, +Sử dụng để thu nhận tế bào mầm. Vì những lý do đó, nguyên bào sợi người được chọn làm đối tượng nghiên cứu. Tuy nhiên, gần đây, nhờ vào việc áp dụng qui trình nghiên cứu của nước ngoài, ở Việt Nam mới bước đầuthành công trong nuôi cấy, tế bào máu ngoại vi, tế bào ối , nhưng những nghiên cứu về chuẩn hóa qui trình nuôi cấy, phân lập và tạo dòng tế bào người vẫn chưa có nơi nào thực hiện nghiên cứu thành công.(Ở Việt Nam) Bắt nguồn từ những lý do đó, chúng tôi lao vào tập nghiên cứu: Phương pháp nuôi cấy, phân lập và tạo dòng Nguyên Bào Sợi từ phôi thai người. Thực hiện đề tài này nhằm đạt được các mục tiêu sau: 2. MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU . 2.1. MỤC TIÊU TỔNG QUÁT. Nghiên cứu nuôi cấy tế bào Nguyên Bào Sợi từ phôi thai người. Thử nghiệm nuôi cấy, phân lập và tạo dòng nguyên bào sợi người từ phôi thai ngoài lấy từ bệnh viện phụ sản Từ Dũ. 2.2. MỤC TIÊU CHUYÊN BIỆT: 1./ Xây dựng qui trình nuôi cấy Nguyên Bào Sợi người từ phôi thai. 2 Đánh giá hiệu quả nuôi cấy Nguyên bàosợi người trên ba môi trường: AMNIOMAX, EMEM, DMEM. 3./ Xác định những yếutố liên quan đến quá trình nuôi cấy: biện pháp vô trùng, liều lượng môi trường