NGHIÊN CỨU CHẾ BIẾN SẢN PHẨM CÓ HOẠT TÍNH SINH HỌC TỪ TRÁI LÊ-KI-MA (Pouteria campechiana)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ TRẦN XUÂN HIỂN NGHIÊN CỨU CHẾ BIẾN SẢN PHẨM CÓ HOẠT TÍNH SINH HỌC TỪ TRÁI LÊ-KI-MA (Pouteria campechiana) LUẬN ÁN TIẾN SỸ NGÀNH CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Mã ngành: 62 54 01 01 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ TRẦN XUÂN HIỂN MSNCS: P1116006 NGHIÊN CỨU CHẾ BIẾN SẢN PHẨM CÓ HOẠT TÍNH SINH HỌC TỪ TRÁI LÊ-KI-MA (Pouteria campechiana) LUẬN ÁN TIẾN SỸ NGÀNH CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Mã ngành: 62 54 01 01 CÁN BỘ HƯỚNG DẪN PGS.TS. HUỲNH LIÊN HƯƠNG PGS.TS. NGUYỄN TRUNG THÀNH 2022 i LỜI CẢM ƠN Luận án hoàn thành ngoài sự nỗ lực của bản thân còn nhờ sự hỗ trợ rất lớn từ các đơn vị và cá nhân trong và ngoài Trường Đại học Cần Thơ và Trường Đại học An Giang. Xin trân trọng gửi lời tri ân chân thành và sâu sắc đến những tấm lòng của quý Thầy, Cô, gia đình, người thân cùng bạn bè! Trường Đại học Cần Thơ - nơi gắn liền với bao kỷ niệm tuổi trẻ và hoài bảo, nơi nâng bước tôi từ một sinh viên, học viên cao học đến hiện tại là nghiên cứu sinh. Vì vậy, tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám Hiệu Trường Đại học Cần Thơ, Ban Chủ nhiệm Khoa Nông Nghiệp, Bộ môn Công nghệ Thực phẩm, Bộ môn Công nghệ Hóa học, Khoa Sau đại học đã giúp đỡ và tạo mọi điều kiện cho tôi thực hiện chương trình nghiên cứu sinh trong 4 năm qua. Tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám Hiệu Trường Đại học An Giang, Ban Chủ nhiệm Khoa Nông Nghiệp & TNTN, Bộ môn Công nghệ Thực phẩm và Bộ phận Thực hành Thí nghiệm - Trường Đại học An Giang đã giúp đỡ, hỗ trợ và tạo mọi điều kiện tốt nhất cho tôi được thực hiện chương trình nghiên cứu sinh trong những năm qua. Tôi xin trân trọng và bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Cô hướng dẫn PGs.Ts. Huỳnh Liên Hương và Thầy hướng dẫn PGs.Ts.Nguyễn Trung Thành cùng với sự hỗ trợ của Gs.Ts.Hà Thanh Toàn, Gs.Ts.Nguyễn Văn Mười, Ts.Phan Thị Bích Trâm trong thời gian qua đã tận tình hướng dẫn, động viên, giúp đỡ và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi học tập, nghiên cứu, chăm bồi kiến thức và hoàn thành luận án. Xin cảm ơn sâu sắc đến PGs.Ts. Nguyễn Công Hà đã hướng dẫn giúp tôi hoàn thành chuyên đề chuyên môn. Chân thành cảm ơn tập thể quý Thầy/Cô Bộ môn Công nghệ Thực phẩm - Khoa Nông Nghiệp (Trường Đại học Cần Thơ) đã tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ và động viên tôi hoàn thành luận án này. Kết quả của luận án cũng nhờ vào sự đóng góp không nhỏ của các em sinh viên ngành Công nghệ Thực phẩm (Đại học An Giang) và ngành Công nghệ Hóa học (Đại học Cần Thơ). Cám ơn vợ - Ts.Lê Thị Thúy Hằng, luôn nắm chặt tay và giúp anh vượt mọi khó khăn trong cuộc sống, hỗ trợ anh rất nhiều trong nghiên cứu. Xin gửi đến gia đình, các con, anh, chị, em và bạn bè những tình cảm yêu thương về sự giúp đỡ, động viên để tôi có thêm nghị lực hoàn thành luận án. Cuối cùng, xin gửi lòng biết ơn sâu sắc và sự kính yêu vô bờ bến đến Ba, Mẹ tôi, người đã cho tôi hình hài, trái tim và khối óc - người đã nuôi dưỡng và giáo dục tôi bằng tất cả tình yêu thương cho tôi có được cuộc sống ngày hôm nay và luôn là điểm tựa tinh thần cho tôi phấn đấu để vượt qua mọi thử thách! Trân trọng, Trần Xuân Hiển ii TÓM TẮT Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu chính là đánh giá các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt tính sinh học của trái lê-ki-ma (Pouteria campechiana) bao gồm điều kiện thu hoạch, tồn trữ và chế biến sâu, làm cơ sở cho việc chế biến các sản phẩm có hoạt tính sinh học từ trái lê-ki-ma. Nội dung luận án tập trung vào các nội dung chính sau: (i) xác định điều kiện tồn trữ tối ưu (thời gian, nhiệt độ tồn trữ) nhằm duy trì các đặc tính hóa lý và hoạt tính sinh học của trái lê-ki-ma ở mức tốt nhất; (ii) đánh giá tác động của các yếu tố kỹ thuật đến thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của trái lê-ki-ma trong quá trình chế biến sâu (trích ly, thủy phân, cô quay chân không, sấy phun), từ đó tối ưu hóa điều kiện chế biến bằng phương pháp bề mặt đáp ứng nhằm đảm bảo tối đa hoạt tính sinh học của sản phẩm thu được; tương tự ảnh hưởng của quá trình chế biến sâu đến hoạt tính sinh học các sản phẩm từ trái lê-ki-ma được đánh giá thông qua hàm lượng polyphenol tổng, flavonoid tổng, hàm lượng carotenoid, tannin và khả năng loại gốc tự do bằng phương pháp DPPH; (iii) bước đầu đánh giá hiệu quả bảo vệ gan của các sản phẩm từ trái lê-ki-ma, hướng đến mở rộng và đa dạng hóa sử dụng trái lê-ki-ma. Kết quả thực nghiệm cho thấy trái lê-ki-ma sau thu hoạch tồn trữ ở nhiệt độ 30÷32oC giữ được chất lượng cao nhất trong khoảng thời gian 8÷10 ngày, được thể hiện qua các yếu tố đánh giá như hàm lượng chất khô hòa tan, tinh bột, acid tổng số, carotenoid, tannin, polyphenol tổng, flavonoid tổng và khả năng loại gốc tự do bằng phương pháp DPPH. Dịch trái lê-ki-ma có hoạt tính sinh học cao nhất (IC50 = 7,32 mg/mL) khi được trích ly với nồng độ ethanol 70%, ở nhiệt độ 50°C trong thời gian 45 phút, tỷ lệ paste lê-ki- ma/ethanol 1/7 g/mL và dịch trích ly lê-ki-ma thu được ở điều kiện tối ưu có hàm lượng polyphenol tổng, flavonoid tổng, carotenoid và tannin lần lượt là 9,59 mgGAE/g; 8,62 mgQE/g, 150,54 µg/g; 68,84 mgTAE/g; khả năng loại gốc tự do DPPH 84,59 % với IC50 = 7,32 mg/mL. Tương tự, điều kiện thích hợp nhất cho việc điều chế dịch thủy phân từ trái lê-ki-ma là nhiệt độ 61°C trong thời gian 65 phút với nồng độ enzyme pectinase 60 UI/g và dịch quả thủy phân ở điều kiện tối ưu có hàm lượng polyphenol tổng, flavonoid tổng, carotenoid và tannin tương ứng là 8,73 mgGAE/g; 7,79 mgQE/g; 119,14 µg/g; 53,55 mgTAE/g; khả năng loại gốc tự do DPPH 86,21% với IC50 đạt 7,82 mg/mL. Dịch trái lê-ki-ma thu được từ quá trình thủy phân được cô đặc bằng phương pháp cô quay chân không (71oC, 51 phút) và sấy phun với nhiệt độ không khí đầu vào 171,5oC, tốc độ dòng nhập liệu 16 rpm và tỷ lệ maltodextrin 17,8%, thu được sản phẩm chính là dịch lê-ki-ma cô quay (có aw 0,801) và bột lê-ki-ma thành phẩm (có aw 0,422). Kết quả đánh giá hoạt tính iii dịch lê-ki-ma cô quay cho thấy hàm lượng polyphenol tổng, flavonoid tổng, carotenoid và tannin lần lượt là 8,02 mgGAE/g; 7,03 mgQE/g; 101,83 µg/g và 40,89 mgTAE/g; khả năng loại gốc tự do DPPH 79,64% với IC50 = 7,35 mg/mL. Trong khi đó, bột lê-ki-ma sấy phun có khả năng loại gốc tự do DPPH 77,28% với IC50 = 9,48 mg/mL; hàm lượng polyphenol tổng, flavonoid tổng, carotenoid và tannin lần lượt là 6,93 mgGAE/g; 6,18 mgQE/g, 28,01 mgTAE/g; 92,93 µg/g. Từ các số liệu phân tích thu được cho thấy luận án đã đạt được mục tiêu tối ưu hóa điều kiện chế biến nhằm đảm bảo tối đa hoạt tính sinh học các sản phẩm từ trái lê-ki-ma. Hiệu quả bảo vệ gan của dịch lê-ki-ma trích ly, dịch lê-ki-ma cô quay và bột lê-ki-ma sấy phun cũng được tiến hành thử nghiệm in-vivo trên chuột được gây viêm gan mạn bằng CCl4. Hiệu quả bảo vệ gan được đánh giá thông qua nồng độ aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, protein toàn phần, albumin, cholesterol, triglyceride và gamma glutamyl transferase trong huyết thanh chuột và khối lượng của chuột cũng như phân tích bệnh học mô gan ở chuột. Kết quả nghiên cứu cho thấy dịch lê-ki-ma trích ly, dịch lê-ki-ma cô quay và bột lê-ki-ma sấy phun đều cho hiệu quả bảo vệ gan tương đương silymarin. Kết quả nghiên cứu chế biến sản phẩm có hoạt tính sinh học từ trái lê- ki-ma đã mở ra tiềm năng to lớn cho việc sử dụng nguồn nguyên liệu trái lê- ki-ma tương đối rẻ tiền và dồi dào ở vùng Đồng bằng Sông Cửu Long, mở ra triển vọng mới cho việc phát triển các sản phẩm thực phẩm giàu các hợp chất có hoạt tính sinh học, hỗ trợ bảo vệ sức khỏe cũng như góp phần nâng cao giá trị cho trái lê-ki-ma. Từ khóa: Trái lê-ki-ma, chống oxy hóa, hoạt tính sinh học, trích ly, thủy phân, tối ưu hóa, sấy phun, cô quay chân không. iv ABSTRACT The study's specific objective was to determine the elements impacting the biological activity of Pouteria campechiana fruit, including harvesting, storage, and deep processing conditions, as a basis for processing bioactive products from P.campechiana fruit. The thesis's content focuses on the following principal components: (i) Determining the appropriate storage conditions (duration, temperature) for P.campechiana fruit to maintain the physicochemical properties and biological activities at the highest qualities; (ii) Evaluating the impact of technical factors on the chemical composition and biological activity of P.campechiana fruit during deep processing (extraction, hydrolysis, vacuum rotary evaporator, and spray drying) and optimising processing conditions utilising the response surface method to ensure the highest possible biological activity of the resulting product; as well as the influence of deep processing on biological activities of P.campechiana fruit products, which were evaluated through total polyphenol content, total flavonoid content, carotenoid content, tannins and antioxidant activity by DPPH method; (iii) Initially evaluate the hepatoprotective efficacy of lekima fruit products, aiming to expand and diversify the use of P.campechiana fruit. The experimental results indicated that after harvest, P.campechiana fruit stored at 30÷32oC maintains the highest quality for 8÷10 days, as measured by soluble dry matter, starch, total acid, carotenoids, tannins, total polyphenols, total flavonoids, and antioxidant activity as determined by the DPPH method. P.campechiana fruit juice demonstrated the highest biological activity (IC50 = 7.32 mg/mL) when extracted with 70% ethanol concentration, at 50°C for 45 minutes, P.campechiana paste/ethanol 1/7 g/mL and P.campechiana extract obtained under optimal conditions contained total polyphenols, total flavonoids, carotenoids and tannins of 9.59 mgGAE/g, 8.62 mgQE/g, 150.54 µg/g, 68.84 mgTAE/g, respectively; DPPH's ability to neutralize free radicals of 84.59% with IC50 = 7.32 mg/mL. Likewise, the optimal conditions for the preparation of P.campechiana fruit hydrolysate were 61°C for 65 minutes with 0.6% pectinase enzyme and hydrolyzed fruit juice with total polyphenols, total flavonoids, carotenoids, and tannins of 8.73 mgGAE/g; 7.79 mgQE/g; 119.14 µg/g; and 53.55 mgTAE/g, respectively; DPPH's ability to neutralize free radicals of 86.21% with IC50 reaching 7.82 mg/mL. The juice obtained from hydrolysis was concentrated by a vacuum rotary evaporator (71oC, 51 min) and spray-dried with an inlet air temperature of 171.5oC, an inlet flow rate of 16 rpm, and a maltodextrin ratio 17.8%, the main products were P.campechiana rotary liquid (aw = 0.801) and finished P.campechiana powder (aw = 0.422). The results of evaluating P.campechiana rotary liquid activity demonstrated that the contents of total polyphenols, total v flavonoids, carotenoids, and tannins were 8.02 mgGAE/g; 7.03 mgQE/g; 101.83 µg/g and 40.89 mgTAE/g, respectively; DPPH's ability to neutralize free radicals of 79.64% with IC50 = 7.35 mg/mL. Meanwhile, spray-dried P.campechiana powder had the ability to remove DPPH free radicals 77.28% with IC50 = 9.48 mg/mL; total polyphenols, total flavonoids, carotenoids and tannins were 6.93 mgGAE/g; 6.18 mgQE/g, 28.01 mgTAE/g; and 92.93 µg/g, respectively. According to the results, the thesis accomplished its objective of optimising processing conditions to assure optimum biological activity of P.campechiana fruit products. The hepatoprotective benefits of P.campechiana extract, P.campechiana rotary liquid, and spray-dried P.campechiana powder were also evaluated in-vivo in mice suffering from chronic hepatitis with CCl4. The hepatoprotective efficacy was determined by alanine aminotransferase and total cholesterol levels in serum, malondialdehyde, and protein carbonyl levels in the liver, mice weight, as well as histopathological analysis of liver tissue. P.campechiana extract, P.campechiana rotary liquid, and spray-dried P.campechiana powder all have the same hepatoprotective effect as silymarin, according to research. The study results on the processing of bioactive compounds from P.campechiana fruit have revealed significant potential for utilising relatively inexpensive and abundant sources in the Mekong Delta, creating new opportunities for the development of bioactive compound-rich food products that promote health protection, while also bolstering the value-add of P.campechiana fruit. Keywords: Pouteria campechiana, antioxidant, biological activity, extraction, hydrolysis, optimization, spray drying, vacuum concentration. vi LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam kết luận án “Nghiên cứu chế biến sản phẩm có hoạt tính sinh học từ trái lê-ki-ma (Pouteria campechiana)” được hoàn thành dựa trên kết quả nghiên cứu của bản thân với sự hướng dẫn của PGs.Ts. Huỳnh Liên Hương và PGs.Ts. Nguyễn Trung Thành. Các số liệu và kết quả trình bày trong luận án là trung thực và chưa được công bố trong bất kỳ luận án cùng cấp nào trước đây. Cần Thơ, ngày tháng năm 2022 Người hướng dẫn Người thực hiện PGs.Ts. Huỳnh Liên Hương Trần Xuân Hiển PGs.Ts. Nguyễn Trung Thành vii MỤC LỤC LỜI CẢM TẠ . i TÓM TẮT ... ii ABSTRACT iv LỜI CAM ĐOAN ... vi MỤC LỤC ... vii DANH SÁCH HÌNH .. xii DANH SÁCH BẢNG.. xvi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT xviii Chương 1. GIỚI THIỆU 1 1.1 Đặt vấn đề .. 1 1.2 Mục tiêu nghiên cứu .. 3 1.3 Đối tượng và nghiên cứu 3 1.4 Nội dung nghiên cứu .. 3 1.5 Ý nghĩa của luận án ... 4 1.6 Điểm mới của luận án 4 Chương 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU ... 5 2.1 Tổng quan về trái lê-ki-ma 5 2.1.1 Nguồn gốc và phân loại trái lê-ki-ma. 5 2.1.2 Thành phần hóa học trái lê-ki-ma .. 7 2.1.3 Các hợp chất có hoạt tính sinh học trong trái lê-ki-ma. 9 2.2 Kỹ thuật trích ly.. 19 2.2.1 Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình trích ly 20 2.2.2 Các nghiên cứu đến quá trình trích ly.. 21 2.3 Kỹ thuật thủy phân pectin... 23 2.3.1 Enzyme pectianase .. 24 2.3.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt động của enzyme... 26 2.3.3 Các nghiên cứu đến quá trình thủy phân .. 27 2.4 Kỹ thuật cô đặc (cô quay chân không)... 28 2.4.1 Các biến đổi của nguyên liệu trong quá trình cô đặc.. 29 2.4.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình cô đặc. 30 viii 2.4.3 Các nghiên cứu đến quá trình cô đặc... 31 2.5 Kỹ thuật sấy phun 31 2.5.1 Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình sấy phun. 33 2.5.2 Tính chất chính của bột sấy phun.. 34 2.5.3 Maltodextrin 36 2.5.4 Các nghiên cứu đến quá trình sấy phun.. 37 2.6 Thử nghiệm in-vivo trên gan của chuột. 38 2.6.1 Vai trò của các hợp chất sinh học trong bảo vệ gan 38 2.6.2 Thử nghiệm in-vivo tổn thương gan 41 2.6.2 Các nghiên cứu thử nghiệm in-vivo 43 Chương 3. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU...................................... 46 3.1 Phương tiện nghiên cứu.. 46 3.1.1 Địa điểm và thời gian nghiên cứu 46 3.1.2 Nguyên liệu sử dụng 46 3.1.3 Thiết bị và dụng cụ . 46 3.1.4 Hóa chất . 47 3.2 Phương pháp nghiên cứu 48 3.2.1 Phương pháp thí nghiệm. 48 3.2.2 Phương pháp phân tích 48 3.3 Nội dung và bố trí thí nghiệm 50 3.3.1 Nội dung 1: Khảo sát ảnh hưởng độ chín trái lê-ki-ma sau thu hoạch đến thành phần hóa học (vật lý) cũng như hàm lượng các hợp chất có hoạt tính sinh học ................. 51 3.3.2 Nội dung 2: Nghiên cứu ảnh hưởng các yếu tố công nghệ quá trình trích ly đến khả năng trích ly hợp chất sinh học paste lê-ki-ma 52 3.3.2.1 Thí nghiệm 2.1: Khảo sát ảnh hưởng nồng độ dung môi ethanol đến khả năng trích ly các hợp chất sinh học trong paste lê-ki-ma .... 52 3.3.2.2 Thí nghiệm 2.2: Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ paste lê-ki-ma/ethanol đến khả năng trích ly hợp chất sinh học paste lê-ki-ma. 52 3.3.2.3 Thí nghiệm 2.3: Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ đến khả năng trích ly các hợp chất sinh học trong paste lê-ki-ma 53 3.3.2.4 Thí nghiệm 2.4: Khảo sát ảnh hưởng thời gian đến khả năng trích ly các hợp chất sinh học trong paste lê-ki-ma 53 ix 3.3.2.5 Thí nghiệm 2.5: Tối ưu hóa quá trình trích ly đến khả năng trích ly các hợp chất sinh học trong paste lê-ki-ma . 54 3.3.3 Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố công nghệ quá trình thủy phân đến khả năng thu nhận hợp chất sinh học paste lê-ki-ma. 55 3.3.3.1 Thí nghiệm 3.1: Khảo sát ảnh hưởng nồng độ pectinase thủy phân đến khả năng thu nhận hợp chất sinh học trong paste lê-ki-ma 55 3.3.3.2 Thí nghiệm 3.2: Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ thủy phân đến khả năng thu nhận các hợp chất sinh học trong paste lê-ki-ma 56 3.3.3.3 Thí nghiệm 3.3: Khảo sát ảnh hưởng thời gian thủy phân khả năng thu nhận đến các hợp chất sinh học trong paste lê-ki-ma 56 3.3.3.4 Thí nghiệm 3.4: Tối ưu hóa quá trình thủy phân đến khả năng thu nhận các hợp chất sinh học trong paste lê-ki-ma. 57 3.3.4 Nội dung 4: Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ và thời gian cô quay chân không thu nhận hợp chất sinh học cao trong dịch quả lê-ki-ma....... 58 3.3.5 Nội dung 5: Nghiên cứu ảnh hưởng các yếu tố công nghệ quá trình sấy phun đến sự biến đổi các hợp chất sinh học bột lê-ki-ma.. 59 3.3.5.1 Thí nghiệm 5.1: Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ maltodextrin bổ sung đến sự biến đổi các hợp chất sinh học trong bột lê-ki-ma 59 3.3.5.2 Thí nghiệm 5.2: Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ không khí đầu vào đến sự biến đổi các hợp chất sinh học trong bột lê-ki-ma ... 60 3.3.5.3 Thí nghiệm 5.3: Khảo sát ảnh hưởng tốc độ dòng nhập liệu đến sự biến đổi các hợp chất sinh học trong bột lê-ki-ma ... 61 3.3.5.4 Thí nghiệm 5.4: Tối ưu hóa quá trình sấy phun tạo bột lê-ki-ma giàu các hợp chất sinh học 61 3.3.6 Nội dung 6: Thử nghiệm in-vivo đối với sản phẩm chế biến từ trái lê-ki-ma về khả năng chống oxy hóa trong bảo vệ gan. 62 Chương 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN.. 64 4.1 Sự thay thành phần hóa học trái lê-ki-ma trong quá trình tồn trữ.. 64 4.2 Ảnh hưởng một số yếu tố đến quá trình trích ly trái lê-ki-ma thu nhận hợp chất sinh học . 71 4.2.1 Ảnh hưởng nồng độ dung môi ethanol đến thu nhận các hợp chất sinh học trong dịch trích ly.. .... 71 4.2.2 Ảnh hưởng tỷ lệ paste lê-ki-ma/ethanol đến thu nhận các hợp chất sinh học trong dịch trích ly................................................................... 73 x 4.2.3 Ảnh hưởng nhiệt độ trích ly đến thu nhận các hợp chất sinh học trong dịch trích ly.................................................................................. 76 4.2.4 Ảnh hưởng thời gian trích ly đến thu nhận các hợp chất sinh học trong dịch trích ly.................................................................................. 78 4.2.5 Tối ưu hóa quá trình trích ly đến thu nhận các hợp chất sinh học trong dịch trích ly.. 80 4.3 Ảnh hưởng một số yếu tố đến quá trình thủy phân paste lê-ki-ma thu nhận hợp chất sinh học . 100 4.3.1 Ảnh hưởng nồng độ pectinase đến thu nhận hợp chất sinh học... 100 4.3.2 Ảnh hưởng nhiệt độ thủy phân đến thu nhận hợp chất sinh học.. 103 4.3.3 Ảnh hưởng thời gian thủy phân đến thu nhận hợp chất sinh học. 105 4.3.4 Tối ưu hóa của các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình thủy phân paste lê-ki-ma thu hợp chất sinh học 107 4.4 Ảnh hưởng nhiệt độ và thời gian cô quay chân không thu nhận các hợp chất sinh học trong dịch lê-ki-ma cô quay.. 121 4.5 Ảnh hưởng các yếu tố đến quá trình sấy phun dịch quả lê-ki-ma thu nhận các hợp chất sinh học trong bột sấy phun. 133 4.5.1 Ảnh hưởng tỷ lệ maltodextrin bổ sung đến các hợp chất sinh học trong bột lê-ki-ma sấy phun.. 133 4.5.2 Ảnh hưởng nhiệt độ không khí đầu vào đến các hợp chất sinh học trong bột lê-ki-ma sấy phun.......................... 137 4.5.3 Ảnh hưởng tốc độ dòng nhập liệu đến các hợp chất sinh học trong bột lê-ki-ma sấy phun.... 140 4.5.4 Tối ưu hóa các yếu tố ảnh hưởng đến các hợp chất sinh học trong bột lê-ki-ma sấy phun 143 4.6 Thử nghiệm in-vivo đối với các sản phẩm từ trái lê-ki-ma về khả năng chống oxy hóa trong hỗ trợ tổn thương gan.... 4.6.1 Trọng lượng tương đối