Các kỹ thuật chính của công nghệ gene

C¸c kü thuËt chÝnh cña c«ng nghÖ gene I. Kh¸i niÖm chung C«ng nghÖ gen (gene technology) hay Kü thuËt di truyÒn (gentic engineering) lµ c«ng nghÖ cèt lâi cña CNSH hiÖn ®¹i C«ng nghÖ gen bao gåm c¸c kü thuËt thùc hiÖn trªn axit nucleic nh»m Nghiªn cøu cÊu tróc cña gen, §iÒu chØnh vµ biÕn ®æi gen, T¸ch, tæng hîp vµ chuyÓn c¸c gen mong muèn vµo c¸c tÕ bµo sinh vËt chñ míi t¹o ra c¸c c¬ thÓ míi, sinh vËt míi mang ®Æc tÝnh míi. Các kỹ thuật chủ yếu Tách chiết gen Nhân dòng gen Xác định trình tự gen Thiết kế các vectơ chuyển gen Chuyển nạp gen Xác định sự thể hiện gen Phát hiện, theo dõi các gen có khả năng cải tiến cây trồng, vật nuôi … qua các thế hệ Nghiên cứu cấu trúc và chức năng của gen Dùng để tạo giống mới có định hướng trong thời gian ngắn Cho phép phân loại ở mức phân tử Chuẩn đoán ở mức phân tử có độ chính xác tuyệt đối Khả năng ứng dụng Ph©n tö ADN ®¬n vÞ ®o ADN ®¬n vÞ ®o khèi l­îng tuyÖt ®èi: picogram ®¬n vÞ ®o th«ng dông: cÆp base: bp, kbp, mbp… 1picogram= 0,29 mg=10-12 g 1 pg DNA = 965 Mbp (Bennett and Smith 1976) ®Æc ®iÓm Lµ ®¹i ph©n tö lín h¬n bÊt kú ph©n tö chÊt h­u c¬ nµo kh¸c cã trong tÕ bµo DNA cña cã chñ yÕu trong nh©n (d¹ng th¼ng, phøc t¹p), ë lôc l¹p, ty thÓ (d¹ng vßng, ®¬n gian) Sè l­îng gen lµ kh¸c nhau ë sinh vËt kh¸c nhau. VÝ dô: Ng­êi: 30,000-39,000; Lóa indica: 45,000-56,000 gen; Lóa Japonica: 32,000-50,000 gen) 1 ph©n tö protein th­êng chøa 400 aa, 1 aa m· ho¸ bëi 3 nucleotide, 1 gen Ýt nhÊt cã 1200 bp Trong DNA, Gen: vïng kh«ng m· ho¸,®o¹n lÆp l¹i kh«ng cã ý nghÜa chiÕm 80-85 % nªn 1 gen (®o¹n DNA) th­êng cã 4-5kbp Ph©n tö DNA cÊu tróc 4 nucleotide C«ng thøc ho¸ häc cña 4 nucleotide Deoxyribose and Ribose Nucleotides t¹o nªn DNA - DNA t¹o nªn genes genes cÊu tróc nªn NST