Tiểu luận So sánh đặc điểm và phương pháp xây dựng thư viện genomic dna, thư viện cdna

SO SÁNH ĐẶC ĐIỂM & PHƯƠNG PHÁP XÂY DỰNG THƯ VIỆN GENOMIC DNA, THƯ VIỆN cDNA. Nhóm 3: Huỳnh Minh Trí Phạm Thị Sương Phạm Thị Lan Bùi Thị Kim Ly NỘI DUNH CHÍNH: THƯ VIỆN GENOMIC DNA THƯ VIỆN cDNA PHƯƠNG PHÁP XÂY DỰNG SO SÁNH Thư viện genomic DNA: Thư viện bộ gene của một sv là tập hợp tất cả các trình tự DNA cấu thành bộ gene được gắn vào vector, sau đó được đưa vào tế bào chủ. Các tế bào chủ được nuôi cấy trên môi trường tạo dòng. Thư viện cDNA là tập hợp tất cả các bản sao từ mRNA của một tế bào, trong một điều kiện sinh lí nhất định, tại một thời điểm nhất định. Thư viện cDNA: TUYỂN CHỌN DÒNG MỤC TIÊU: Để có thể phân lập dòng tế bào chủ tái tổ hợp chứa gene mục tiêu trong một thư viện DNA hay một thư viện cDNA, người ta phải sử dụng các phương pháp sàng lọc. Thông thường các phương pháp sàng lọc được xây dựng dựa trên việc sử dụng mẫu dò DNA. Mẫu dò DNA (probe) là một đoạn oliogonucleotide được đánh dấu và bổ sung hoặc bổ sung một phần với gene mục tiêu. TUYỂN CHỌN DÒNG MỤC TIÊU: Gene được biểu hiện trong tế bào chủ là vi khuẩn: + Lai miễn dịch (Western blot) + Hoạt tính enzyme + Bổ trợ đột biến (gene ngoại lai đồng dạng với gene của tế bào chủ) Gene ngoại lai không biểu hiện trong tế bào chủ: Lai insitu: + Lai khuẩn lạc (colony hybridization): vector là plasmid + Lai plaque (plaque colonization): vector là phage SO SÁNH: SO SÁNH: SO SÁNH: SO SÁNH: Tài liệu tham khảo : Nguồn thuviensinhhoc.com  Tìm: chương 207, kỹ thuật tạo thư viện genomic DNA và thư viện cDNA. Nguyễn Hoàng Lộc & cộng sự, giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp, Nxb ĐHQG Tp.HCM