Ngành chăn nuôi nói chung và chăn nuôi lợn nói riêng đang ngày càng phát
triển và chiếm vị trí quan trọng trong nền nông nghiệp nước ta. Cùng với các tiến
bộ kỹ thuật về giống, thức ăn, quản lý, thú y kết hợp với các biện pháp khuyến
khích chăn nuôi của nhà nước làm cho ngành chăn nuôi lợn phát triển với tốc độ
tương đối cao, mang lại hiệu quả kinh tế cho người dân đồng thời góp phần vào
nền kinh tế quốc gia.
Tuy nhiên, ngành chăn nuôi lợn cũng có nhiều thách thức đó là sự gia tăng
và diễn biến ngày càng phức tạp của dịch bệnh, trong đó Hội chứng bệnh do
PCV2 được coi là nguyên nhân gây thiệt hại kinh tế nghiêm trọng. Tại Việt Nam,
Hội chứng còi cọc ở lợn con sau cai sữa xuất hiện đầu tiên vào năm 2000 và gây
ra những ảnh hưởng đáng kể cho ngành chăn nuôi lợn. Tuy nhiên các nghiên
cứu về sự lưu hành, đặc điểm dịch tễ học và sự đồng nhiễm của PCV2 với một
số mầm bệnh khác đến nay còn hạn chế và mới chỉ tập trung theo vùng, miền.
Xuất phát từ các vấn đề nêu trên, chúng tôi tiến hành đề tài nghiên cứu
nhằm làm rõ về sự lưu hành, hoàn thiện bức tranh về đặc điểm dịch tễ học phân
tử và sự đồng nhiễm của PCV2 với một số virus trong điều kiện sản xuất thực tế
của các cơ sở chăn nuôi lợn xuyên suốt ở cả ba miền Bắc – Trung – Nam trên cả
nước. Kết quả của đề tài là cơ sở khoa học quan trọng mở ra hướng nghiên cứu
mới và đề ra các biện pháp phòng chống bệnh do PCV2 có hiệu quả, nhất là
công tác lựa chọn chủng virus phù hợp trong sản xuất vắc xin phòng bệnh cho
đàn lợn nuôi trong nước.
27 trang |
Chia sẻ: thientruc20 | Lượt xem: 427 | Lượt tải: 1
Bạn đang xem trước 20 trang tài liệu Tóm tắt Luận án Nghiên cứu sự lưu hành và đặc điểm dịch tễ học phân tử của porcine circovirus type 2 (PCV2) ở lợn nuôi tại Việt Nam, để xem tài liệu hoàn chỉnh bạn click vào nút DOWNLOAD ở trên
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM
PHẠM HỒNG QUÂN
NGHIÊN CỨU SỰ LƯU HÀNH VÀ ĐẶC ĐIỂM DỊCH
TỄ HỌC PHÂN TỬ CỦA PORCINE CIRCOVIRUS
TYPE 2 (PCV2) Ở LỢN NUÔI TẠI VIỆT NAM
CHUYÊN NGÀNH: DỊCH TỄ HỌC THÚ Y
MÃ SỐ: 9 64 01 08
TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ
Hà Nội, 2019
Công trình được hoàn thành tại: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
Người hướng dẫn khoa học 1: PGS.TS. Huỳnh Thị Mỹ Lệ
Người hướng dẫn khoa học 2: PSG.TS. Phạm Công Hoạt
Phản biện 1: GS.TS. Nguyễn Quang Tuyên
Trường Đại Học Nông lâm, Đại học Thái Nguyên
Phản biện 2: PGS. TS. Nguyễn Hữu Nam
Học viện Nông nghiệp Việt Nam
Phản biện 3: TS. Bùi Nghĩa Vượng
Viện Thú y
Luận án sẽ được bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án cấp Học viện họp tại Học
viện Nông nghiệp Việt Nam vào hồi . giờ . ngày.. tháng . năm 2018
Có thể tìm hiểu luận án tại thư viện:
- Thư viện Quốc gia Việt Nam
- Thư viện Học viện Nông nghiệp Việt Nam
1
PHẦN 1. MỞ ĐẦU
1.1. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI
Ngành chăn nuôi nói chung và chăn nuôi lợn nói riêng đang ngày càng phát
triển và chiếm vị trí quan trọng trong nền nông nghiệp nước ta. Cùng với các tiến
bộ kỹ thuật về giống, thức ăn, quản lý, thú y kết hợp với các biện pháp khuyến
khích chăn nuôi của nhà nước làm cho ngành chăn nuôi lợn phát triển với tốc độ
tương đối cao, mang lại hiệu quả kinh tế cho người dân đồng thời góp phần vào
nền kinh tế quốc gia.
Tuy nhiên, ngành chăn nuôi lợn cũng có nhiều thách thức đó là sự gia tăng
và diễn biến ngày càng phức tạp của dịch bệnh, trong đó Hội chứng bệnh do
PCV2 được coi là nguyên nhân gây thiệt hại kinh tế nghiêm trọng. Tại Việt Nam,
Hội chứng còi cọc ở lợn con sau cai sữa xuất hiện đầu tiên vào năm 2000 và gây
ra những ảnh hưởng đáng kể cho ngành chăn nuôi lợn. Tuy nhiên các nghiên
cứu về sự lưu hành, đặc điểm dịch tễ học và sự đồng nhiễm của PCV2 với một
số mầm bệnh khác đến nay còn hạn chế và mới chỉ tập trung theo vùng, miền.
Xuất phát từ các vấn đề nêu trên, chúng tôi tiến hành đề tài nghiên cứu
nhằm làm rõ về sự lưu hành, hoàn thiện bức tranh về đặc điểm dịch tễ học phân
tử và sự đồng nhiễm của PCV2 với một số virus trong điều kiện sản xuất thực tế
của các cơ sở chăn nuôi lợn xuyên suốt ở cả ba miền Bắc – Trung – Nam trên cả
nước. Kết quả của đề tài là cơ sở khoa học quan trọng mở ra hướng nghiên cứu
mới và đề ra các biện pháp phòng chống bệnh do PCV2 có hiệu quả, nhất là
công tác lựa chọn chủng virus phù hợp trong sản xuất vắc xin phòng bệnh cho
đàn lợn nuôi trong nước.
1.2. MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI
- Xác định sự lưu hành và một số đặc điểm dịch tễ học phân tử của PCV2 ở
lợn nuôi tại Việt Nam.
- Xác định sự đồng nhiễm của PCV2 với một số ADN, ARN virus ở lợn
nuôi tại Việt Nam.
1.3. PHẠM VI NGHIÊN CỨU
Mẫu được thu thập từ các trại nuôi lợn thuộc 14 tỉnh nghiên cứu đại diện
2
cho ba miền Bắc – Trung – Nam ở Việt Nam bao gồm: Thái Nguyên, Hà Nội,
Hòa Bình, Bắc Ninh, Hưng Yên, Hải Phòng, Hải Dương, Hà Tĩnh, Quảng Trị,
Thừa Thiên Huế, Quảng Nam, Bình Dương, Tiền Giang và Vĩnh Long.
Thời gian thực hiện từ tháng 6 năm 2015 đến tháng 6 năm 2018.
1.4. NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA ĐỀ TÀI
- Xác định được tỷ lệ lưu hành và bổ sung đầy đủ thêm bức tranh dịch tễ về
virus PCV2 đang lưu hành tại Việt Nam.
- Đánh giá được sự đồng nhiễm của PCV2 với một số virus (PPV, TTV,
PRRS, PCV3) ở lợn nuôi tại Việt Nam.
- Trong quá trình thực hiện đề tài đã xác định thêm được sự lưu hành của
loài virus mới PCV3 ở lợn nuôi tại Việt Nam.
1.5. Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI
1.5.1. Ý nghĩa khoa học
- Đây là một trong những nghiên cứu có hệ thống về sự lưu hành, đặc điểm
dịch tễ học phân tử của PCV2 và sự đồng nhiễm của PCV2 với một số virus ở
lợn nuôi tại Việt Nam.
- Đây là nghiên cứu mới về Porcine circovirus 3 (PCV3), một loài virus
mới lưu hành của ở đàn lợn nuôi tại Việt Nam.
- Kết quả nghiên cứu của đề tài là tài liệu tham khảo tốt phục vụ cho những
nghiên cứu tiếp theo về PCV.
1.5.2. Ý nghĩa thực tiễn
- Khuyến cáo cho việc sử dụng vắc xin phòng bệnh phù hợp với nhánh
virus mới lưu hành trong thực tế ở mỗi khu vực nghiên cứu.
- Kết quả nghiên cứu của đề tài giúp chủ động đề xuất được biện pháp
phòng PCVAD có hiệu quả, hạn chế thiệt hại do dịch bệnh gây ra bởi PCV2 cho
đàn lợn nuôi tại Việt Nam.
- Trên cơ sở phát hiện của đề tài về một loài virus mới PCV3, mở ra hướng
nghiên cứu sâu hơn về đánh giá sự lưu hành, cũng như vai trò gây bệnh và tác
động của PCV3 tới sức sản xuất của đàn lợn để đưa ra các giải pháp phòng,
chống có hiệu quả.
3
PHẦN 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
2.1. TÌNH HÌNH CHĂN NUÔI LỢN TẠI VIỆT NAM
Ngành chăn nuôi lợn của Việt Nam chủ yếu là chăn nuôi nhỏ lẻ ở qui mô
hộ gia đình, môi trường chăn nuôi không đảm bảo vệ sinh thú y, phong tục tập
quán của người Việt Nam mang nhiều yếu tố nguy cơ làm phát sinh và lây lan
dịch bệnh ở lợn như: sử dụng thịt lợn tươi sống là chủ yếu, giết mổ nhỏ lẻ tại hộ
gia đình, sử dụng cả thịt lợn mắc bệnh, buôn bán lợn nhỏ lẻ không qua kiểm
dịch thú y, chăn nuôi lợn tận dụng nguồn thức ăn thừa từ các nhà hàng,... nên
nhiều loại dịch bệnh ở lợn, trong đó có Hội chứng bệnh do PCV2 có thể tồn tại,
lưu hành trong thời gian dài.
2.2. BỆNH DO PCV2 GÂY RA Ở LỢN NUÔI
2.2.1. Giới thiệu về PCV2
2.2.1.1. Phân loại
PCV2 thuộc giống Circovirus, họ Circoviridae. Họ circoviridae gồm 2
giống: Giống Anellovirus, Giống Circovirus.
2.2.1.2. Hình thái, cấu trúc
PCV mang bộ gen là ADN virus sợi đơn vòng chứa khoảng 1759
nucleotide (PCV1) và khoảng 1767 - 1768 nucleotide (PCV2).
2.2.1.3. Sức đề kháng
PCV2 có khả năng sống được 15 phút ở nhiệt độ 70oC, bị bất hoạt ở pH= 3.
Ở nhiệt độ phòng, khi bị tác động trong 10 phút bởi một số chất sát trùng như
chlorhexidine, formaldehyde, iodine, vikon và cồn thì hiệu giá của virus giảm.
2.2.2. Dịch tễ học của bệnh do PCV2
2.2.2.1. Loài cảm thụ
Tất cả các giống lợn đều mẫn cảm với bệnh, kể cả lợn nuôi và lợn hoang dã.
2.2.2.2. Chất chứa mầm bệnh
Mầm bệnh có trong dịch bài xuất, bài tiết và trong huyết thanh, virus còn
có thể bài thải qua tinh dịch, phân, nước tiểu, sữa non, sữa từ lợn nhiễm bệnh.
2.2.2.3. Phương thức truyền lây
Sự lây lan của PCV2 từ lợn sang lợn, từ người sang lợn, từ động vật gặm
nhấm sang lợn, từ ký sinh trùng sang lợn, từ môi trường chuồng trại sang lợn.
Mầm bệnh xâm nhập vào cơ thể chủ yếu qua đường miệng - mũi.
4
2.2.3. Cơ chế sinh bệnh
PCV2 gây suy giảm miễn dịch dẫn tới tác động đáng kể lên sức sản xuất ở
lợn, từ đó tạo điều kiện thuận lợi cho nhiều loại mầm bệnh khác xâm nhập và
gây bệnh.
2.2.4. Triệu chứng và bệnh tích ở lợn mắc PCV2
2.2.4.1. Triệu chứng lâm sàng
Hiện tượng xác gầy và sưng ở các hạch lympho, còi cọc, lông thô, khô xơ
xác, ngoài ra có một tỷ lệ lớn lợn có triệu chứng về hô hấp và bị ỉa chảy.
2.2.4.2. Bệnh tích
Hiện tượng sưng và xuất huyết ở các hạch lympho; ngoài ra, các tổn
thương còn biểu hiện ở một số cơ quan như phổi có biểu hiện viêm ở các mức
độ khác nhau, gan, thận, ruột, lách xuất huyết.
2.2.5. Một số hội chứng ở lợn có liên quan đến sự nhiễm PCV2
Hội chứng gầy còm ở lợn sau cai sữa, Hội chứng viêm da và viêm thận,
Hội chứng rối loạn sinh sản ở lợn, Hội chứng rối loạn hô hấp ở lợn, Hội chứng
viêm ruột ở lợn, Hiện tượng nhiễm PCV2 thể cận lâm sàng.
2.2.6. Chẩn đoán
Chẩn đoán lâm sàng, Chẩn đoán phân biệt, Chẩn đoán huyết thanh học,
Chẩn đoán sinh học phân tử.
2.2.7. Phòng bệnh
Thay đổi phương thức chăn nuôi, áp dụng các biện pháp an toàn sinh học,
chuồng trại đảm bảo vệ sinh thú y, lợn mua về cần được kiểm dịch và chăm sóc
nuôi dưỡng tốt. Phòng bệnh bằng vắc xin.
2.2.8. Điều trị
Bệnh do virus nên không có thuốc điều trị đặc hiệu.
2.3. HIỆN TƯỢNG ĐỒNG NHIỄM DO PCV2 GÂY RA
Trong thực tế có nhiều giả thuyết được đưa ra nhằm giải thích tại sao có nhiều
căn nguyên kết hợp cùng với PCV2 trong hội chứng còi cọc ở lợn sau cai sữa.
Trước hết, có thể một số mầm bệnh có cùng cơ chế sinh bệnh gây ảnh hưởng đến
hệ miễn dịch của cơ thể, khiến cho lợn nhiễm PCV2 có triệu chứng của PMWS
(Darwich et al., 2003). Opriessnig et al. (2007) cho biết mặc dù hầu hết lợn trong
đàn có thể bị nhiễm PCV2 nhưng chỉ có khoảng 5 – 30% lợn mẫn cảm biểu hiện
triệu chứng. Có bốn yếu tố ảnh hưởng đến sự phát sinh PCVAD do nhiễm PCV2 là
5
cấu trúc và độc lực virus, giống lợn, sự đồng nhiễm, trạng thái miễn dịch của cơ thể.
Thử nghiệm lâm sàng đã chứng minh trong điều kiện thực nghiệm một
mình PCV2 không gây bệnh mà kết hợp với một số virus như PRRS, PPV, TTV
mới gây bệnh thể lâm sàng. Trong hầu hết các trường hợp lợn có triệu chứng lâm
sàng rõ khi được gây nhiễm đồng thời với một số mầm bệnh truyền nhiễm hoặc
không truyền nhiễm (Rovira et al., 2002). Do đó PCV2 được coi là điều kiện cần
nhưng chưa đủ để gây thành bệnh (Tomás et al., 2008).
2.4. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGOÀI NƯỚC VỀ PCV2
2.4.1. Tình hình nghiên cứu trên thế giới
PCV2 được phát hiện năm 1991 tại Canada nhưng kết quả nghiên cứu của
Jacobsen et al. (2009) khẳng định sự tồn tại của PCV2 ở lợn từ năm 1962 tại miền
Bắc nước Đức.
PCV2 có 4 genotype chính (PCV2a, PCV2b, PCV2c và PCV2d) và 8 nhánh
di truyền (cluster) 2A-2E và 1A-1C được công nhận. PCV2b chủ yếu được phát
hiện kể từ năm 2003.
Điểm đặc biệt trong cơ chế sinh bệnh của PCV2 là hiện tượng đa nhiễm hoặc
bội nhiễm với nhiều loại mầm bệnh khác. Các nghiên cứu cho thấy yếu tố đồng
nhiễm như nhiễm đồng thời với các tác nhân gây bệnh liên quan đến sự phát
triển của PCVAD (Hasslung et al., 2005; Opriessnig et al., 2012).
2.4.2. Tình hình nghiên cứu trong nước
Bằng chứng huyết thanh học cho thấy sự xuất hiện của PCV2 vào năm 2000
(Nguyễn Thị Thu Hồng và cs., 2006). Từ đó đến nay, các nghiên cứu về PCV2
được thực hiện đều khẳng định sự hiện diện và nguy cơ ngày càng lan rộng của
PCV2 ở mọi quy mô chăn nuôi lợn. Tuy nhiên, các nghiên cứu mới chỉ tập trung
theo vùng, miền (miền Bắc, miền Trung hoặc miền Nam), chưa có nghiên cứu nào
thực hiện để làm rõ sự lưu hành và cập nhật về đặc điểm dịch tễ học phân tử, sự
đồng nhiễm của PCV2 xuyên suốt ở cả 3 miền Bắc – Trung - Nam trên cả nước.
Đề tài được thực hiện với mục đích làm sáng tỏ về sự lưu hành, hoàn thiện bức
tranh về đặc điểm dịch tễ học phân tử và sự đồng nhiễm của PCV2 với một số virus
ở lợn nuôi xuyên suốt tại ba miền Bắc – Trung – Nam của Việt Nam. Kết quả của đề
tài là cơ sở khoa học quan trọng mở ra hướng nghiên cứu mới và công tác lựa chọn
chủng virus phù hợp trong sản xuất vắc xin phòng bệnh cho đàn lợn trong nước.
6
PHẦN 3
NỘI DUNG - VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.1. ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU
- Mẫu được lấy tại các trại chăn nuôi lợn thuộc 14 tỉnh tại Việt Nam.
- Nghiên cứu được tiến hành tại khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt
Nam; cùng với sự giúp đỡ của Trung tâm chẩn đoán Thú y Trung ương.
- Giải trình tự gen được thực hiện tại Công ty 1st BASE, Singapore.
3.2. THỜI GIAN NGHIÊN CỨU
Nghiên cứu được tiến hành từ tháng 6 năm 2015 đến tháng 3 năm 2019.
3.3. VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU
- Mẫu nghiên cứu được thu thập ở cả lợn ốm và lợn khỏe bình thường.
- Các loại dụng cụ, sinh phẩm và hóa chất dùng: tách chiết ADN/ARN tổng
số, phản ứng PCR/ Realtime PCR và giải trình tự gen.
3.4. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU
- Xác định sự lưu hành của PCV2 ở lợn nuôi tại Việt Nam.
- Xác định đặc điểm dịch tễ học phân tử của PCV2 lưu hành ở lợn nuôi tại
Việt Nam.
- Xác định sự đồng nhiễm của PCV2 với một số ADN virus (TTV, PPV,
PCV3) và ARN virus (PRRS) ở lợn nuôi tại Việt Nam.
3.5. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.5.1. Phương pháp tính toán dung lượng mẫu
Để phát hiện tỷ lệ lưu hành PCV2 ở lợn nuôi, thiết kế lấy mẫu bệnh phẩm
nghiên cứu bằng phương pháp lấy mẫu ngẫu nhiên đơn giản, nhiều giai đoạn để
thu thập mẫu bao gồm các tầng/giai đoạn như sau:
Tính số lượng mẫu ở từng cấp độ, sử dụng công thức sau:
2
2
1
1
e
zn
Trong đó: n1: Số cơ sở/mẫu cần lấy; P: Là tỷ lệ lưu hành ước tính (dựa vào
số liệu tổng quan các nghiên cứu từ năm 2000 – 2018 đã tổng hợp được tỷ lệ lưu
hành ước tính ở từng cấp độ); z = 1.96, tương đương với độ tin cậy 95%; e = Sai
số tuyệt đối giữa giá trị ước tính so với mức độ lưu hành thực tế. Trong nghiên
cứu này, chúng tôi chọn sai số (e) = 10%.
Tổng hợp tình hình lấy mẫu nghiên cứu được trình bày ở bảng 4.1.
7
Bảng 4.1. Tổng hợp tình hình lấy mẫu nghiên cứu
TT Tỉnh
Số xã cần
lấy mẫu
Số cơ sở
cần lấy
mẫu/1 xã
Số mẫu
cần lấy/1
cơ sở
Tổng số
mẫu xét
nghiệm
Mẫu
gộp thí
nghiệm
(a) (b) (c)
1 Bắc Ninh 5 5 5 125 25
2 Hải Dương 5 5 5 125 25
3 Hòa Bình 5 5 5 125 25
4 Hà Nội 5 5 5 125 25
5 Hải Phòng 5 5 5 125 25
6 Hưng Yên 5 5 5 125 25
7 Thái Nguyên 5 5 5 125 25
8 Hà Tĩnh 5 5 5 125 25
9 Quảng Trị 5 5 5 125 25
10 Huế 5 5 5 125 25
11 Quảng Nam 5 5 5 125 25
12 Bình Dương 5 5 5 125 25
13 Tiền Giang 5 5 5 125 25
14 Vĩnh Long 5 5 5 125 25
Tổng số 70 70 70 1.750 350
Ghi chú: (a) Giai đoạn 1: lựa chọn số xã; (b) Giai đoạn 2: lựa chọn số cơ sở nuôi; (c) Giai đoạn 3: tính số mẫu
cần lấy. Tổng số mẫu xét nghiệm = Số xã cần lấy mẫu x Số cơ sở cần lấy mẫu/1 xã x số mẫu cần lấy/1 cơ sở.
Với đặc điểm chăn nuôi lợn nhỏ lẻ chiếm đa số (trên 70%, theo số liệu
thống kê của các tỉnh), do đó để tăng cơ hội phát hiện được bệnh, chúng tôi
quyết định tại mỗi xã, lấy 25 mẫu tại 05 cơ sở, hộ chăn nuôi lợn, mỗi hộ tiến
hành lấy 05 mẫu đủ để gộp thành 01 mẫu xét nghiệm.
3.5.2. Phương pháp điều tra hồi cứu
Khi giải trình tự gen và phân tích cây phát sinh loài của virus PCV2, điều
tra ngược lại các mẫu đã được xét nghiệm trong phòng thí nghiệm.
3.5.3. Phương pháp thu thập mẫu
Sử dung phương pháp thu thập mẫu huyết thanh, mẫu dịch hầu họng và
mẫu phủ tạng.
3.5.4. Phương pháp chiết tách ADN/ARN
Sử dụng bộ kit TacoTM DNA/RNA Extraction Kit, máy chiết tách nucleic
acid tự động TacoTM và theo hướng dẫn của nhà sản xuất.
8
3.5.5. Phương pháp Realtime PCR
Áp dụng theo phương pháp Realtime PCR của Trung tâm chẩn đoán Thú y
Trung ương đã được công nhận ISO/IEC 17025:2005.
3.5.6. Phương pháp PCR
Sử dụng kít PCR thương mại (i-StarMaster) và theo hướng dẫn của nhà sản
xuất. Đối với sản phẩm PCR phục vụ giải trình tự gen (nhân lên bởi cặp mồi
CV1/CV2, CV3/CV4), sản phẩm PCR được tinh sạch bằng sạch bằng QIAquick
PCR Purification Kit (Qiagen).
3.5.7. Phương pháp giải trình tự và hoàn thiện trình tự gen
Thực hiện tại công ty 1st BASE (Singapore).
3.5.8. Phương pháp phân tích trình tự gen
Sử dụng Chương trình MEGA 6 để dựng cây phát sinh chủng loại.
3.5.9. Xây dựng cây phát sinh chủng loại
Sử dụng phần mềm MEGA6 để xây dựng cây phả hệ được dựa trên trình tự
gen mã hóa capsid protein (gen ORF2).
3.5.10. Phương pháp nghiên cứu đặc điểm dịch tễ học phân tử theo không
gian - thời gian
Sử dụng các phần mềm Quantum GIS, phần mềm BEAST, SpreaD3.
3.5.11. Phương pháp đo lường tính đa dạng về di truyền
Sử dụng phương pháp Principal Coordinate Analysis (PCoA).
3.5.12. Phương pháp xử lý số liệu
Xử lý bằng phần mềm MS Excel 2010; so sánh sự sai khác giữa các yếu tố
bằng phép thử χ2 (phần mềm Minitab 14.0) và phép thử Fisher Exact Test (phần
mềm SAS 9.1).
PHẦN 4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
4.1. SỰ LƯU HÀNH PCV2 Ở LỢN NUÔI TẠI VIỆT NAM
4.1.1. Kết quả nghiên cứu sự lưu hành PCV2 theo địa phương
Nghiên cứu này đã lấy mẫu để nghiên cứu sự lưu hành PCV2 đồng thời ở
ba miền Bắc - Trung - Nam và trong khoảng thời gian từ 2015-2018 được trình
bày ở hình 4.1 và bảng 4.1.
9
A 2006 B 2012 C 2015
D 2015-20182018 2018E F
Phạm vi lấy mẫu của các nghiên cứu trước đây: (A) Nguyễn Thị Thu Hồng và cs. (2006), (B) Huỳnh Thị Mỹ Lệ
và cs. (2012), (C) Bùi Trần Anh Đào và cs. (2015), (D) (Phạm Hoàng Sơn Hưng và cs. (2018), (E) Lê Thị Thu
Phương và cs. (2018). Phạm vi lấy mẫu của đề tài này (F).
Hình 4.1. Kết quả so sánh về phạm vi lấy mẫu phát hiện PCV2
Kết quả xác định tỷ lệ lưu hành PCV2 ở lợn nuôi tại 14 tỉnh đại diện cho
ba miền Bắc – Trung – Nam được trình bày ở bảng 4.1 và hình 4.2.
Bảng 4.1. Kết quả xác định sự có mặt của PCV2 từ các địa phương
TT Tỉnh
Số mẫu xét
nghiệm
Số mẫu
dương tính
Tỷ lệ (%) dương tính
(95%CI)
1 Bắc Ninh 25 8 32,00 (14,95 – 53,50)
2 Hải Dương 25 6 24,00 (9,36 – 45,13)
3 Hòa Bình 25 10 40,00 (21,13 – 61,33)
4 Hà Nội 25 22 88,00 (68,78 – 97,45)
5 Hải Phòng 25 4 16,00 (4,54 – 36,08)
6 Hưng Yên 25 8 32,00 (14,95 – 53,50)
7 Thái Nguyên 25 5 20,00 (6,83 – 40,70)
8 Hà Tĩnh 25 13 52,00 (31,31 – 72,20)
9 Quảng Trị 25 14 56,00 (34,93 – 75,60)
10 Thừa Thiên Huế 25 9 36,00 (17,97 – 57,48)
11 Quảng Nam 25 13 52,00 (31,31 – 72,20)
12 Bình Dương 25 11 44,00 (24,40 – 65,07)
13 Tiền Giang 25 14 56,00 (34,93 – 75,60)
14 Vĩnh Long 25 7 28,00 (12,07 – 49,39)
Tổng hợp 350 144 41,14
10
Hình 4.2. Tỷ lệ dương tính với PCV2 tại các địa phương thu mẫu
Tỷ lệ lưu hành PCV2 ở Việt Nam là 41,14%. Kết quả nghiên cứu cũng chỉ
ra PCV2 lưu hành ở tất cả các tỉnh nghiên cứu (14/14) với tỷ lệ không nhỏ dao
động từ 16% - 88%, trong đó tỷ lệ mẫu kiểm tra dương tính với PCV2 cao
nhất ở Hà Nội là 88%, thấp nhất ở Hải Phòng là 16%.
4.1.2. Kết quả xác định sự lưu hành PCV2 theo quy mô chăn nuôi
Kết quả xác định tỷ lệ lưu hành PCV2 theo quy mô đàn được trình bày ở
bảng 4.2.
Bảng 4.2. Tỷ lệ lưu hành PCV2 ở đàn lợn theo các quy mô chăn nuôi
TT
Quy mô đàn
(con)
Tổng số mẫu
kiểm tra
Số mẫu
dương tính
Tỷ lệ (%) dương tính
(95%CI)
1 <100 con 110 46 41,82 (32,48 – 51,61)
2 100 - 300 62 17 27,42 (16,85 – 40,23)
3 300 - 500 98 43 43,88 (33,87 – 54,27)
4 >500 80 38 47,50 (36,21 – 58,98)
Tổng hợp 350 144 41,14
Ở các đàn lợn nuôi có quy mô khác nhau thì tỷ lệ dương tính với PCV2
khác nhau, cụ thể những đàn lợn có quy mô lớn hơn 500 con thì tỷ lệ dương
tính trung bình là 47,50%, tỷ lệ dương tính thấp nhất ở quy mô 100-300 con
là 27,42%. Ở những trại có mức quy mô đàn phổ biến từ 300 – 500 con và
nhỏ hơn 100 con thì tỷ lệ lưu hành PCV2 khá cao, lần lượt trung bình là
43,88% và 41,82%. Tuy tỷ lệ dương tính với PCV2 giữa các quy mô đàn có
11
vẻ khác nhau lớn nhưng kiểm định χ2 cho biết trên phương diện thống kê, các
tỷ lệ này không khác nhau vì trị số p = 0,4085 > 0,05.
4.1.3. Kết quả xác định tỷ lệ lưu hành PCV2 ở đàn lợn thuộc các lứa tuổi
Kết quả xác định tỷ lệ lưu hành PCV2 của lợn ở các lứa tuổi khác nhau
được trình bày ở bảng 4.3.
Bảng 4.3. Kết quả xác định tỷ lệ lưu hành PCV2 ở các lứa tuổi lợn
TT Nguồn gốc mẫu
Tổng số mẫu
kiểm tra
Số mẫu
dương tính
Tỷ lệ (%) dương tính
(95%CI)
1 Lợn con theo mẹ 96 38 39,58 (29,75 – 50,08)
2 Lợn thịt 186 84 45,16 (37,87 – 52,61)
3 Lợn nái 68 22 32,35 (21,51 – 44,79)
Tổng hợp 350 144 41,14
Mẫu bệnh phẩm lợn dương tính với PCV2 ở bất cứ nhóm tuổi nào, tỷ lệ
dương tính thấp nhất là lợn nái đạt 32,35%; thấp hơn so với hai lứa tuổi lợn con
theo mẹ và lợn thịt lần lượt là 39,58% và 45,16%. Tuy tỷ lệ dương tính với
PCV2 ở các lứa tuổi lợn có vẻ khác nhau lớn nhưng kiểm định χ2 cho biết trên
phương diện thống kê, các tỷ lệ này không khác nhau vì trị số p = 0,4704 > 0,05.
4.1.4. Kết quả nghiên cứu sự lưu hành của bệnh do PCV2 gây ra
Kết quả theo dõi triệu chứng lâm sàng của một số lợn nghi mắc PMWS
trong quá trình thu mẫu tại các địa phương như còi cọc, chậm lớn, lông thô, triệu
chứng hô hấp, tiêu chảy và viêm da được ghi nhận.
Trong quá trình thu mẫu, một số lợn nghi mắc PMWS được mổ khám để
kiểm tra bệnh tích đại thể. Kết quả cho thấy nhìn chung hiện tượng sưng to và
phân thùy ở các hạch lympho (đặc biệt hạch bẹn nông và hạch màng treo ruột) là
phổ biến. Ngoài ra, các tổn thương còn biểu hiện ở một số cơ quan như phổi có
biểu hiện viêm ở các mức độ khác nhau, gan, thận, ruột, lách xuất huyết.
4.2. ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ HỌC PHÂN TỬ CỦA PCV2
Đến thời điểm hiện tại, các nghiên cứu về đặc điểm dịch tễ học